Взятие мокроты на микобактерии туберкулеза

Взятие мокроты для исследования на микобактерии туберкулеза (МБТ)

Взятие мокроты для исследования на микобактерии туберкулеза (МБТ)

Алгоритм выполнения взятия мокроты для исследования на МБТ (микобактерии туберкулеза)

Подготовка к процедуре:

  1. Представиться пациенту, объяснить ход и цель процедуры, получить согласие
  2. Необходимо собирать три образца мокроты в течение 2 дней согласно графику
  3. Проконтролировать чтобы утром пациент почистил зубы, прополоскал рот и глотку кипяченой водой (контроль этой процедуры может осуществлять младший медицинский персонал)
  4. Обработать руки гигиеническим способом.
  5. Надеть перчатки, маску, фартук

Выполнение процедуры

  1. Попросить пациента откашлять и собрать первый образец мокроты в чистую емкость в количестве 15-20 мл.
  2. Закрыть крышку, протереть салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, на емкости поставить идентификационный номер образца, доставить в лабораторию.
  1. На следующий день утром проконтролировать чтобы пациент почистил зубы, прополоскал рот и глотку кипяченой водой (контроль этой процедуры может осуществлять младший медицинский персонал)
  2. Попросить пациента откашлять и собрать второй образец мокроты в чистую емкость в количестве 15-20 мл.
  3. Закрыть крышку, протереть салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, на ёмкости поставить идентификационный номер образца, доставить в лабораторию.
  4. Через несколько часов ( до обеда ) пациент должен прополоскать рот и глотку кипяченой водой (контроль этой процедуры может осуществлять младший медицинский персонал).
  5. Попросить пациента откашлять и собрать третий образец мокроты в чистую емкость в количестве 15-20 мл.
  6. Закрыть крышку, протереть салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором, на ёмкости поставить идентификационный номер образца, доставить в лабораторию.

Окончание процедуры

  1. Снять маску, перчатки, фартук поместить в емкость для дезинфекции
  2. Обработать руки гигиеническим способом.
  3. Оформить направление специального образца
  4. Сделать соответствующую запись о результатах выполнения в медицинскую документацию.

5. Организовать доставку материала в лабораторию.

Дополнительные сведения об особенностях выполнения методики

Для получения достоверных результатов необходимо соблюдать:

— график сбора мокроты;

— методику сбора мокроты;

— правильное оформление направления на проведение микроскопии мокроты

— правила транспортировки образцов мокроты.

Во время транспортировки образцов ёмкости должны быть плотно упакованы в контейнере во избежание протекания, не подвергать ёмкости внешнему воздействию.

С целью диагностики собирают 3 образца мокроты, с целью контроля лечения 2.

Форма информированного согласия пациента при выполнении методики и дополнительная информация для пациента и членов его семьи

  1. При поступлении в стационар пациент подписывает добровольное информированное согласие на медицинское вмешательство (на основе ст.32, 33 «Основ Законодательства РФ об охране здоровья граждан» приказ от 29.03.2011 № 101);
  2. Лечение в стационаре, пациенту может проводиться по решению суда.

3. Пациент должен быть информирован о предстоящем исследовании. Информация о взятии мокроты на ВК, сообщаемая ему медицинским работником, включает сведения о цели данного исследования. Письменного подтверждения согласия пациента или его родственников на взятие мокроты на МБТ не требуется, так как данный диагностический метод не является потенциально опасным для жизни и здоровья пациента

Параметры оценки и контроля качества выполнения методики

— Наличие записи о результатах выполнения назначения в медицинской документации.

— Своевременность выполнения процедуры( в соответствии со временем назначения).

— Своевременность доставки образцов в лабораторию

— Отсутствие отклонений от алгоритма выполнения процедуры

— Удовлетворенность пациента качеством предоставленной медицинской услуги

Взятие мокроты на микобактерии туберкулеза

⇐ ПредыдущаяСтр 22 из 25

Техника взятия мокроты на микобактерии туберкулеза
1. Накануне вечером пациента предупреждают о предстоящем исследовании следующим образом: «Завтра с 6.00 утра вам нужно начать собирать мокроту на исследование. Мокрота на назначенное вам исследование собирается в течение суток. Это значит, что всю мокроту, которая будет у вас выделяться при кашле, необходимо сплевывать в эту банку. Банку, пожалуйста, ставьте в прохладное место и плотно закрывайте крышкой». Необходимо показать пациенту то место, где в течение суток будет храниться банка с мокротой.
2. Собранную мокроту отправляют в бактериологическую лабораторию.
3. Результат исследования вклеивают в медицинскую карту стационарного больного.
Примечания. Если у пациента выделяется мало мокроты и ее будет недостаточно для исследования, то мокроту можно собирать в течение 3 сут, сохраняя в прохладном месте.

34. Уход за больными с легочно-сердечной патологией.

Пульмонологией (лат. pulmo — лёгкое; греч. logos — учение) называют раздел внутренних болезней, изучающий патологию органов дыхания и разрабатывающий методы профилактики, диагностики и лечения заболеваний дыхательной системы.

Наблюдение и уход за больными с патологией органов дыхания следует проводить в двух направлениях.

• Общие мероприятия — мероприятия по наблюдению и уходу, в которых нуждаются пациенты с любыми заболеваниями различных органов и систем: наблюдение за общим состоянием больного, термометрия, наблюдение за пульсом и АД, заполнение температурного листа, обеспечение личной гигиены больного, подача судна и др.

• Специальные мероприятия — мероприятия по наблюдению и уходу, направленные на помощь больным с симптомами, характерными для заболеваний органов дыхания, — одышкой, кашлем, кровохарканьем, болью и др.

35. Оксигенотерапия.

При выраженной степени дыхательной недостаточности следует провести оксигенотерапию (лат. oxygenium -кислород; греч. therapeia — лечение) — применение кислорода в лечебных целях. Использование кислорода оказывает ощутимую помощь больным с тяжёлой одышкой, особенно — с одышкой в покое. Перед применением кислорода необходимо убедиться в проходимости дыхательных пу-

тей!

Показания: острая или хроническая дыхательная недостаточность, сопровождающаяся цианозом (синюшным оттенком кожи и слизистых оболочек), тахикардией (сердцебиением), снижением парциального давления кислорода в крови.

Для лечения применяют кислородную смесь, содержащую от 40 до 80% кислорода. При отравлении угарным газом применяют карбоген (смесь, содержащую 95% кислорода и 5% углекислого газа); при отёке лёгких кислородную смесь барботируют через пеногасители (50-96% раствор этилового спирта или 10% спиртовой раствор кремнийорганического соединения антифомсилана).

Нельзя использовать чистый кислород, так как он может угнетать дыхательный центр, вызвать ожог дыха-

тельных путей и, кроме того, оказать токсическое действие на организм человека, проявляющееся сухостью

во рту, болью в грудной клетке, судорогами, потерей сознания.

Существуют следующие способы подачи кислорода.

1. Подача кислорода из кислородной подушки. Этот способ чаще применяют в домашних условиях; в стационарах же его используют в тех случаях, когда нет возможности обеспечить больного подачей кислорода из баллона. Кислородная подушка представляет собой прорезиненный мешок ёмкостью от 10 до 75 л, снабжённый резиновой трубкой с краном и мундштуком. Объёма кислородно-воздушной смеси в подушке ёмкостью 10-25 л хватает, как правило, всего лишь на 5-7 мин. При подаче больному кислородной подушки следует обернуть мундштук 2-3 слоями смоченной в воде марли для увлажнения кислорода.

2. Подача кислорода через носовые катетеры — кислород подаётся из хранящегося в специальном помещении баллона со сжатым кислородом по системе металлических трубок, проведённых в палату (так называемая централизованная подача кислорода). Для увлажнения кислород пропускают через воду с помощью аппарата Боброва. Кислородный баллон ёмкостью в 40 л и давлением в 150 атм. окрашен в синий цвет и имеет надпись «Кислород медицинский».

Аппарат Боброва (российский хирург Бобров Александр Алексеевич, 1850-1904) — аппарат, принцип работы

которого заключается в создании небольшого избыточного давления в градуированном сосуде с вводимой

жидкостью путём нагнетания в него воздуха.

Больному кислород подают под давлением 2-3 атм, поэтому к баллону присоединён специальный редуктор с двумя манометрами, один из которых показывает давление в баллоне, второй давление кислорода на выходе из редуктора, т.е. давление кислорода, подаваемого пациенту.

3. Подача кислорода через маску (рис. 12-2). При накладывании на лицо маска должна закрывать рот и нос. Маска имеет вдыхательный

и выдыхательный каналы. Тубус вдыхательного канала соединён с дыхательным мешком из тонкой резины, в котором во время выдоха накапливается кислород, а при вдохе кислород активно засасывается лёгкими. Для увлажнения кислород пропускают через воду с помощью аппарата Боброва.

4. Подача кислорода через аппарат искусственной вентиляции лёгких (ИВЛ). В этом случае подачу кислорода осуществляют посредством интубационной трубки.

5. Гипербарическая оксигенация, или оксигенобаротерапия(греч. barys — тяжёлый), — лечебно-профилактический метод насыщения

организма кислородом под повышенным давлением. Сеансы гипербарической оксигенации проводят в специальных барокамерах. Барокамера представляет собой герметически закрывающееся помещение, в котором может быть создано искусственно повышенное давление воздуха (газов). Габариты барокамеры и оборудование обеспечивают возможность длительного пребывания в барокамере нескольких больных. В пульмонологии оксигенобаротерапию применяют в комплексном лечении гнойно-обструктивных заболеваний лёгких.

36. Оказание первой доврачебной помощи больному во время удушья при бронхиальной астме.

Астма, или удушье (греч. asthma — тяжёлое короткое дыхание), — общее название остро развивающихся приступов одышки различного происхождения. Приступ удушья лёгочного происхождения вследствие спазма бронхов называют бронхиальной астмой. При застое крови в малом круге кровообращения развивается сердечная астма.

При появлении у больного одышки или удушья медсестра должна немедленно сообщить врачу свои наблюдения за характером одышки, частотой дыхания, а также принять меры для облегчения состояния больного.

1. Создать вокруг больного обстановку покоя, успокоить его и окружающих.

2. Помочь больному принять возвышенное (полусидящее) положение, приподняв головной конец кровати или подложив под голову и спину подушки.

3. Освободить от стесняющей одежды и тяжёлых одеял.

4. Обеспечить доступ свежего воздуха в помещение (открыть форточку).

5. При наличии соответствующего назначения врача дать больному карманный ингалятор и объяснить, как им пользоваться.

Пользование карманным ингалятором при бронхиаль-

ной астме):

1. Снять с мундштука баллончика с аэрозолем защитный колпачок.

2. Повернуть баллончик вверх дном и хорошо встряхнуть его.

3. Попросить пациента сделать глубокий выдох.

4. Объяснить больному, что он должен плотно обхватить губами мундштук и сделать глубокий вдох, при этом одновременно нажимая на клапан баллончика; после вдоха больной должен задержать дыхание на несколько секунд.

5. После этого попросить больного вынуть мундштук изо рта и сделать медленный выдох.

Количество доз аэрозоля определяет врач. После вдыхания глюкокортикоидов больной должен прополоскать рот водой для профилактики развития кандидоза полости рта.

37. Подготовка к проведению плевральной пункции.

Пункция (лат. punctio — укол, прокол), или парацентез (греч. parakentesis – прокалывание сбоку), — диагностическая или лечебная манипуляция: прокол тканей, патологического образования, стенки сосуда, органа или полости тела полой иглой или троакаром.

Троакар (франц. trocart) — хирургический инструмент в виде стального остроконечного стилета с надетой на

него трубкой.

Плевральной пункцией, или плевроцентезом (греч. pleura — бок, ребро, kentesis — прокол), или торакоцентезом (греч. thorakos — грудь, kentesis — прокол), называют прокол грудной клетки с введением иглы или троакара в плевральную полость для извлечения из неё жидкости. У здорового человека в плевральной полости находится очень небольшое количество жидкости — до 50 мл.

Цели: удаление скопившейся в плевральной полости жидкости, определение её характера (выпот воспалительного или невоспалительного генеза) для уточнения диагноза, а также введение в плевральную полость лекарств.

Плевральную пункцию проводит только врач, медицинская сестра ему ассистирует (помогает).

Порядок выполнения процедуры:

1. За 15-20 мин до пункции по назначению врача сделать больному подкожную инъекцию сульфокамфорной кислоты + прокаина («Сульфокамфокаина») или никетамида.

2. Усадить раздетого по пояс больного на стул лицом к спинке, попросить его одной рукой опереться на спинку стула, а другую (со стороны локализации патологического процесса) завести за голову.

3. Попросить больного слегка наклонить туловище в сторону, противоположную той, где врач будет проводить пункцию.

4. Вымыть руки с мылом проточной водой и обработать их дезинфицирующим раствором.

5. Надеть стерильные маску, халат, перчатки.

6. Обработать предполагаемое место прокола 5% спиртовым раствором йода, затем — 70% раствором спирта и снова йодом.

7. Сделать местную анестезию 0,25% раствором прокаина (медсестра подаёт врачу шприц с раствором прокаина) в седьмом или восьмом межрёберном промежутке по лопаточной или задней подмышечной линии.

8. Пункцию проводит врач в зоне максимальной тупости перкуторного звука (обычно в седьмом-восьмом межреберьях); прокол делают в межреберье по верхнему краю нижележащего ребра (рис. 8-10, а), так как по нижнему краю ребра проходит сосудисто-нервный пучок и можно повредить межрёберные сосуды. При попадании иглы в плевральную полость появляется ощущение «провала» в свободное пространство (рис. 8-10, б).

9. Для пробной пункции применяют шприц ёмкостью 10-20 мл с толстой иглой, а для удаления большого количества жидкости — шприц Жане или электроотсос (медицинская сестра должна подать шприц, включить электроотсос).

10. С диагностической целью в шприц набирают 50-100 мл жидкости, медсестра выливает её в предварительно подписанные пробирки и направляет по назначению врача на физикохимическое, цитологическое или бактериологическое исследование.

При скоплении большого объёма жидкости удаляют лишь 800-1200 мл, так как изъятие большего количест-

ва может привести к излишне быстрому смещению органов средостения в больную сторону и коллапсу.

11. После извлечения иглы место прокола смазать 5% спиртовым раствором йода и наложить стерильную повязку.

12. Поместить использованные предметы в ёмкость с дезинфицирующим раствором.

После пункции больной должен лежать 2 ч и в течение суток быть под наблюдением дежурных медицин-

ской сестры и врача.

38. Измерение артериального давления и запись в истории болезни.

Артериальным называют давление, образующееся в артериальной системе во время работы сердца. В зависимости от фазы сердечного цикла различают систолическое и диастолическое АД.

• Систолическое АД, или максимальное, возникает в артериях вслед за систолой левого желудочка и соответствует максимальному подъёму пульсовой волны.

• Диастолическое АД поддерживается в артериях в диастолу благодаря их тонусу и соответствует спадению пульсовой волны.

• Разницу между величинами систолического и диастолического АД называют пульсовым давлением.

АД зависит от величины сердечного выброса, общего периферического сосудистого сопротивления, ОЦК, ЧСС. Измерение АД — важный метод контроля за состоянием гемодинамики как у здоровых, так и у больных людей.

Измерение АД можно проводить прямым и непрямым методами. Прямой метод предполагает введение датчика манометра непосредственно в кровяное русло. Этот метод применяют при катетеризации с целью определения давления в крупных сосудах или полостях сердца. В повседневной практике АД измеряют непрямым аускультативным методом, предложенным в 1905 г. русским хирургом Николаем Сергеевичем Коротковым, с использованием сфигмоманометра (аппарата Рива-Роччи, также называемого тонометром).

Правила измерения

1. Измерение АД проводят в положении человека лёжа или сидя на стуле. В последнем случае пациент

должен сесть на стул с прямой спинкой, опереться спиной на спинку стула, расслабить ноги и не скрещивать их, руку положить на стол. Опора спины на стул и расположение руки на столе исключают подъём АД из-за изометрического мышечного сокращения.

2. Измерять АД рекомендуется через 1-2 ч после приёма пищи и не ранее чем через 1 ч после употребления кофе и курения.

3. Манжета (внутренняя резиновая её часть) сфигмоманометра должна охватывать не менее 80% окружности плеча и покрывать 2/3 его длины.

4. Необходимо произвести не менее трёх измерений с интервалом не менее чем в 5 мин. Завеличину АД принимают среднее значение, вычисленное из полученных за два последних измерения.

Техника измеренияАД (рис. 13-4):

1. Предложить пациенту принять удобное положение (лёжа или сидя на стуле); рука его должна лежать свободно, ладонью вверх.

2. Наложить пациенту на плечо манжету сфигмоманометра на уровне его сердца (середина манжеты должна примерно соответствовать уровню четвёртого межреберья) таким образом, чтобы нижний край манжеты (с местом выхода резиновой трубки) находился примерно на 2-2,5 см выше локтевого сгиба, а между плечом больного и манжетой можно было бы провести один палец. При этом середина баллона манжеты должна находиться точно над пальпируемой артерией, а расположение резиновой трубки не должно мешать аускультации артерии.

Неправильное наложение манжеты может привести к искусственному изменению АД. Отклонение положе-

ния середины манжеты от уровня сердца на 1 см приводит к изменению уровня АД на 0,8 мм рт. ст.: повы-

шению АД при положении манжеты ниже уровня сердца и, наоборот, понижению АД при положении ман-

жеты выше уровня сердца.

3. Соединить трубку манжеты с трубкой манометра .

4. Установив пальцы левой руки в локтевую ямку над плечевой артерией (её находят по пульсации),

правой рукой при закрытом вентиле сжиманием груши в манжету быстро накачать воздух и определить уровень, при котором исчезает пульсация плечевой артерии.

5. Приоткрыть вентиль, медленно выпустить воздух из манжеты, установить фонендоскоп в локтевую ямку над плечевой артерией.

6. При закрытом вентиле сжиманием резиновой груши в манжету быстро накачать воздух до тех пор, пока по манометру давление в манжете не превысит на 20-30 мм рт. ст. тот уровень, при котором исчезает пульсация на плечевой артерии (т.е. несколько выше

величины предполагаемого систолического АД).

Если воздух в манжету нагнетать медленно, нарушение венозного оттока может вызвать у пациента сильные болевые ощущения и «смазать» звучность тонов.

7. Приоткрыть вентиль и постепенно выпускать (стравливать) воздух из манжеты со скоростью 2 мм рт. ст. в 1 с (замедление выпускания воздуха занижает значения АД), проводя при этом выслушивание (аускультацию) плечевой артерии.

8. Отметить на манометре значение, соответствующее появлению первых звуков (тонов Короткова, обусловленных ударами пульсовой волны), — систолическое АД; значение манометра, при котором звуки исчезают, соответствует диастолическому АД.

9. Выпустить весь воздух из манжетки, открыв вентиль, затем разъединить стык резиновых трубок и снять манжету с руки пациента.

10. Занести полученные величины АД в температурный лист в виде столбиков красного цвета соответственно шкале АД. Значение АД округляют до ближайших 2 мм рт. ст. АД можно измерять также осциллографическим методом (существуют специальные отече-

ственные приборы для измерения АД этим методом), который позволяет, кроме показателей АД, оценить ещё и состояние сосудистой стенки, тонус сосудов, скорость кровотока. При компьютерной обработке сигнала при этом также высчитываются величины ударного, минутного объёмов сердца, общего периферического сосудистого сопротивления и, что важно, их соответст-

вие друг другу. Нормальный уровень систолического АД у взрослого человека колеблется в пределах 100-

139 мм рт. ст., диастолического — 60-89 мм рт. ст. Повышенным АД считают с уровня 140/90 мм рт. ст. и выше (артериальная гипертензия, или артериальная гипертония), пониженным – менее 100/60 мм рт. ст. (артериальная гипотензия). Резкое повышение АД называют гипертоническим кризом, который, помимо быстрого повышения АД, проявляется сильной головной болью, головокружением, тошнотой и рвотой.

  • Главная
  • Избранное
  • Популярное
  • Новые добавления
  • Случайная статья

⇐ Предыдущая12

Цель. Выделение микобактерии туберкулеза

Показания. Подозрение на туберкулез легких.

Оснащение. Стерильная сухая банка с плотно закрывающейся крышкой.

Техника взятия мокроты на микобактерии туберкулеза
1. Накануне вечером пациента предупреждают о предстоящем исследовании следующим образом: «Завтра с 6.00 утра вам нужно начать собирать мокроту на исследование. Мокрота на назначенное вам исследование собирается в течение суток. Это значит, что всю мокроту, которая будет у вас выделяться при кашле, необходимо сплевывать в эту банку. Банку, пожалуйста, ставьте в прохладное место и плотно закрывайте крышкой». Необходимо показать пациенту то место, где в течение суток будет храниться банка с мокротой.

2. При исследовании мокроты на микобактерии туберкулеза необходимо трехкратное получение материала в течение суток

.
3. Собранную мокроту отправляют в бактериологическую лабораторию.

4. Результат исследования вклеивают в медицинскую карту стационарного больного.

Примечания. Если у пациента выделяется мало мокроты и ее будет недостаточно для исследования, то мокроту можно собирать в течение 3 сут, сохраняя в прохладном месте.

Иллюстрация
3: Микроскопирование препарата

Срок доставки материала в лабораторию при комнатной температуре в течение 1-2 часов, при температуре 2-8°С – 5-6 часов.

Бактериологическое исследование мокроты позволяет обнаружить возбудителей заболеваний легких. Гнойный, кровянистый комочек мокроты растирают между двумя предметными стеклами. Высохшие мазки фиксируют на огне, затем один окрашивают по Граму, другой по Цилю — Нельсену.

Техника окраски по Граму:

1. Подготавливают бумажки, пропитанные генциановым или кристаллическим фиолетовым. Для этого полоски фильтровальной бумаги пропитывают 1% раствором красителя и высушивают.

2. На фиксированный мазок накладывают бумажки, пропитанные краской, заливают небольшим количеством воды, краситель быстро диффундирует и окрашивает мазок.

3. Окраску ведут 2 минуты, затем бумажку удаляют пинцетом.

4. Не промывая препарат водой, сливают краску и наносят раствор Люголя на 30-60 секунд до почернения препарата, затем раствор Люголя сливают.

5. Не промывая водой, погружают препарат в 96% этанол на 20-30 секунд. Обесцвечивание спиртом производят до отхождения фиолетовых струй краски.

6. Препарат тщательно промывают водой для удаления спирта.

7. Окрашивают мазок водным фуксином 2 минуты.

8. Промывают мазок водой до тех пор, пока струи воды не станут бесцветными.

9. Высушивают препарат фильтровальной бумагой.

10. Грамположительные микробы окрашиваются в сине-фиолетовый, грамотрицательные — в красный цвет.

Иллюстрация
4: Набор препаратов для окраски по Граму

а) раствор генцианового фиолетового

б) раствор Люголя

в) раствор фуксина

Иллюстрация
5: Окраска по Граму

Иллюстрация
7: Стрептококк, окраска по Граму

Иллюстрация
8: Стафилококк, окраска по Граму

Когда препарат открашен по Граму, в нем можно обнаружить различные микроорганизмы. В частности, в препарате будут явно видны грамположительные капсульный пневмококк, стрептококк и стафилококк.

Встречается также клебсиелла (известная как грамотрицательная капсульная диплобацилла Фриндлера), палочка Пфейффера и многие другие их типы. Необходимо понимать, что незначительное число таких микроорганизмов всегда присутствует в дыхательных путях полностью здорового человека.

Однако, если организм попадает в особые условия, то микроорганизмы становятся патогенными и приводят как к возникновению, так и к развитию ряда заболеваний, включая пневмонию, абсцесс легкого, не говоря уже про бронхит и многие другие болезни.

У пациента, страдающего от таких заболеваний, в мокроте можно найти множество подобных микроорганизмов. Впрочем, лишь их количество не говорит о том, что эти микроорганизмы являются патогенными.

Окраска по методу Цилю-Нильсена. Этот метод применяют для окрашивания кислотоустойчивых микроорганизмов, которые не окрашиваются с помощью других методов, и для выявления спор.

Техника окраски:

1. Фиксированный мазок покрывают фильтровальной бумагой, на которую наливают карболовый фуксин Циля.

2. Держа препарат пинцетом, мазок подогревают над пламенем горелки до появления паров.

3. Добавляют новую порцию красителя и повторяют манипуляцию в течение 3-5 минут.

4. Снимают бумажку пинцетом и после охлаждения предметного стекла до комнатной температуры тщательно промывают мазок водой.

5. Обесцвечивают мазок 5% раствором серной кислоты, опуская предметное стекло на 20-30 секунд в стаканчик с кислотой.

6. Тщательно промывают водой.

7. Окрашивают спиртоводным раствором метиленового синего в течение 5 минут, промывают водой и высушивают, осторожно накладывая фильтровальную бумагу.

Кислотоустойчивые бактерии достаточно хорошо держат новую окраску, не теряют цвета и имеют красный цвет, который хорошо выделяется на синеватом фоне других составляющих мокроты. Эти составляющие лишены цвета или имеют иной окрас.

Иллюстрация
9: Набор для окраске по методу Циля-Нильсена

Иллюстрация
10: Микобактерии туберкулеза

Если микобактерий в материале мало и их не удается обнаружить в мазках обычным путем, применяют методы обогащения — гомогенизации и флотации, также применяется такой метод накопления, как электрофорез.

Метод гомогенизации. Суточное количество мокроты выливают во флакон или банку. Добавляют равный объем 1%-го водного раствора гидроксида натрия, плотно закрывают резиновой пробкой и энергично встряхивают до полной гомогенизации (10 — 15 минут). Мокроту, утратившую вязкость, центрифугируюют, осадок нейтрализуют с добавлением 2-3 капель 10%-й соляной кислоты или 30%-й уксусной кислоты. Из осадка готовят мазки и окрашивают по методу Циля-Нильсена.

Метод флотации.

1. Суточное (иногда 2-суточное) количество мокроты гомогенизируют описанным выше способом.

2. Для того чтобы в материале не осталось слзистых комочов, флакон с гомогенизированной мокротой помещают на 30 мин в водяную баню при 55 градусах по Цельсию.

3. Затем добавляют 1-2 мл ксилола (можно вместо ксилола добавить бензин, бензол и т. п.) и встряхивают в течение 10 минут

4. Доводят дистиллированной водой уровень жидкости до горлышка флаконы и дают ей 20-30 минут отстояться при комнатной температуре. Кпельки кслола с адсорбированными микобактериями всплывают, образуя сливкооборазный слой — флотационное кольцо.

5. Материал из флотационного кольца берут петлей в форме улитки или пипеткой и наносят на предметное стекло, помещенное на подогретое до 55 градусов по Цельсию над водяной баней стекло.

6. Высохший мазок покрывают новой парцией материала до тех пор, пока на предметное стекло не будет перенесена большая часть флотационного слоя.

7. Препарат промывают эфиром, высушивают, фиксируют и окрашивают по методу Циля-Нильсена.

Технология электрофореза. Через разжиженную мокроту подается постоянный ток, и микобактерии начинают перемещатся к катоду. Далее достаточно взять мазки с поверхности такого катода и окрасить их по методу Циля-Нильсена.

Для микроскопической диагностики туберкулеза широко при­меняют люминесцентную микроскопию. Фиксированный препа­рат окрашивают 15 мин аурамин-родамином (при подогревании), затем обесцвечивают 3%-м солянокислым спиртом (погружением на 30 с), при необходимости для погашения фона докрашивают перманганатом калия (КМпО4) или метиленовым синим, тща­тельно промывают и микроскопируют в ультрафиолете при уве­личении от 250х до 650х. Наблюдают ярко-желтое свечение микобактерий на темном фоне.

При микроскопическом исследовании следует уделить особое внимание осмотру всей площади мазка. Чтобы с уверенностью судить о наличии или отсутствии микобактерий в препарате, сле­дует просмотреть не менее 100 полей зрения.

Бактериоскопический метод позволяет лишь обнаружить кис­лотоустойчивые микобактерии, поэтому является ориентировоч­ным методом диагностики. Для точной дифференциации мико­бактерии необходимо применить другие методы, в частности бак­териологический .

Если исследования бактериоскопического типа не позволяют найти возбудителя заболевания, необходимо воспользоваться методом посева мокроты на питательные среды. Бактериологичекое исследование дает возможноть идентифицировать микробов, выяснить показатели их вирулентности и устойсивости к антибиотикам.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *